健脾化瘀法中药治疗肝癌的临床与实验研究

【摘要】目的：肝癌是我国乃至世界上最常见和预后最差的恶性肿瘤之一。肝癌高度恶性,易侵犯血管,进而肝内和肝外转移,这是肝癌容易治疗失败的最主要原因。目前肝癌的总体治疗效果仍不理想。大部分肝癌患者因肿瘤转移而丧失手术等根治性治疗机会。针对转移性肝癌的治疗西医采用靶向药物如索拉菲尼或联合方案化疗,客观有效率低,靶向药物价格昂贵而化疗则副作用比较明显,最终效果均不理想。中医在治疗晚期肝癌有其特色和优势。健脾化瘀法治疗肝癌的理论根源于《金匮要略》,是中医治疗肝癌重要治法。既往探讨其抗癌机制集中于抑制肝癌细胞增殖或诱导凋亡。上皮间质转化(epithelialmesenchymaltransition,EMT)是指上皮细胞失去上皮特征,获得侵袭潜能和干细胞样特征并向间质细胞转化现象。结合前期对Smad蛋白的研究及最新进展“EMT是肝癌侵袭转移关键步骤”,深入研究健脾化瘀法中药抗癌作用和对肝癌细胞EMT的影响及其调控机制,有助于为中医药治疗肝癌提供理论依据和治疗新靶点,是一个值得深入探讨和具有重大现实意义的科学问题。本研究的目的是进一步探讨健脾化瘀法中药治疗肝癌的临床疗效及安全性,并从Smad3调控和EMT角度探讨健脾化瘀法中药的抗癌机制。方法：1)临床研究：将120例肝癌患者随机分为两组,治疗组60例采用手术并健脾化瘀法中药治疗,对照组60例采用手术治疗。以无瘤生存率和生存率作为主要评价指标分析疗效。对比两组患者术后1周肝功能恢复情况、术后并发症发生率以及平均住院时间等指标。2)实验研究：建立人肝癌细胞MHCC97-H裸鼠原位移植瘤模型,分成健脾化瘀中药灌胃的治疗组(20只)及灭菌生理盐水灌胃的对照组(20只)。记录两组肝内原位移植病灶,肝和肺转移比例、瘤体大小。用免疫组化方法检测人肝癌细胞MHCC97-H裸鼠原位移植瘤模型中肝癌病灶Smad3、E-cadherin、N-cadherin和vimentin蛋白的表达水平。结果：临床研究：1)两组患者治疗前的临床基线资料差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。两组患者无治疗相关死亡病例。治疗组术后出现并发症14例(23.3%),对照组术后出现并发症12例(20.05),差异无统计学意义(x2=0.196,P=0.658)。术后1周肝功能恢复情况比较,治疗组除了ALT明显比对照组好,差异有统计学意义(t=2.053,P=0.042),其余差异无统计学意义。平均住院时间治疗组比对照组减少0.9天,差异有统计学意义(t=2.146,P=0.34)。术后1月治疗组PS评分(1.05±0.47),对照组为(1.17±0.46),差异无统计学意义(t=1.183,P=0.169)。入组患者在随访时间内104例复发,1、3、5年无瘤生存率分别为77.4%、26.3%和9.0%,中位无瘤时间25.6(6.0-68.0)个月。其中治疗组48例复发,对照组56例,差异有统计学意义(χ2=4.615,P=0.032)。治疗组患者1、3和5年无瘤生存率分别是78.2%、29.2%和14.3%,中位无瘤时间28.7(9.0-68.0)个月；对照组1、3、5年无瘤生存率分别是75.0%、23.3%和6.4%,中位时间22.6(6.0-62.0)个月,差异有统计学意义(χ2=4.017,P=0.045)。全组患者随访时间内101例死亡,1、3、5年生存率分别为97.5%、76.4%和40.5%,中位生存期51.2(10.0-72.0)个月。治疗组患者1、3和5年生存率分别是98.3%、78.0%和43.6%,中位生存期52.6(12.0-72.0)个月；对照组患者1、3、5年生存率分别是96.7%、74.7%和37.4%,中位生存期49.8(10.0-70.0)个月,差异有统计学意义(χ2=3.921,P=0.048)。动物实验：两组40只裸鼠建立人肝癌细胞MHCC97-H裸鼠原位移植瘤模型,移植部位均全部成瘤。健脾化瘀方治疗组肝内癌灶体积[(2180±690)mm3]明显低于对照组者[(3151±580)mm3],(t=10.12,P<0.01).健脾化瘀方治疗组与对照组相比,裸鼠肝内转移率和肺转移率明显下降,(65%vs.95%,P=0.044；55%vs.90%,P=0.013).治疗组肝癌组织Smad3的阳性表达率25%(5/20),对照组Smad3的阳性表达率60%(12/20),差异有统计学意义(χ2=5.013,P=0.025)。治疗组E-cadherin和N-cadherin的阳性表达率分别为80%(16/20)和35%(7/20),对照组相应的阳性表达率分别为45%(9/20)和70%(14/20),差异有统计学意义(χ2=5.227,P=0.022；χ2=4.912,P=0.027)；治疗组和对照组的vimentin阳性表达率分别为40%(8/20)和70%(14/20),差异无统计学意义(χ2=3.636,P=0.057)。结论：1)手术联合健脾化瘀法中药治疗安全性好,可降低肝癌术后复发转移率,提高患者的无瘤生存率和长期生存率。2)健脾化瘀法中药能抑制肝癌的侵袭转移,可能与下调Smad3蛋白水平,从而抑制肝癌EMT有关。
【作者】钟崇；
【导师】谢建兴；
【作者基本信息】广州中医药大学，中西医结合临床（专业学位），2014，博士
【关键词】肝细胞癌；健脾化瘀法；Smad3蛋白；上皮间质转化；转移；

【参考文献】
[1]王瑞霞,宫宇.高校新媒体联动机制初探——以北京交通大学为例[J].北京教育(德育),2014,06:36-38.
[2]王伟龙.基于信任和能量的LEACH协议分析与改进[D].西北师范大学,计算机软件与理论,2013,硕士.
[3]王俊鹏.Cu掺杂ZnO纳米片的制备及其性能研究[D].河南科技大学,材料学,2013,硕士.
[4]吴广.压平机的设计与厚板压平参数的研究[D].燕山大学,机械设计及理论,2014,硕士.
[5]徐新艳,杨慧.大学信息技术基础教学中存在的问题及对策研究[J].中国电力教育,2014,02:145-146.
[6]赖成喆.移动通信系统中的认证和隐私保护协议研究[D].西安电子科技大学,密码学,2014,博士.
[7]李萍萍,夏志军,胡永光.利用Delphi开发温室黄瓜生长动态模拟系统[J].江苏大学学报(自然科学版),2003,04:13-16.
[8]张捍东,熊渝.微机控制系统的抗干扰设计第1讲接地抗干扰[J].冶金自动化,1996,04:52-54+56.
[9]肖玉婷.绿沉漆颜色审美文化研究[D].江南大学,设计艺术学,2012,硕士.
[10]徐楠,施国新,曾晓敏,丁小余,徐勤松,陈源.Hg~(2+)胁迫对浮萍体细胞DNA一级结构和抗氧化酶系的损伤(英文)[J].植物生态学报,2003,03:299-303.
[11]赵鑫.创新类券商业务多元化、经营绩效与风险相关性研究[D].安徽大学,金融学,2013,硕士.
[12]简旭飞.高等教育大众化背景下大学生择业观问题研究[D].沈阳师范大学,高等教育学,2014,硕士.
[13]陈敏.重庆市主城区大气PM_(10)、PM_(2.5)中PAHs分布规律解析[D].西南大学,环境科学,2013,硕士.
[14]胡劲纬.多域环境中的授权管理和授权起源研究[D].华中科技大学,2010.
[15]王贺.高密度选择压力下玉米自交系选育方法的研究[D].吉林农业大学,作物遗传育种,2012,硕士.
[16]陈悦,安燮南,高东杰.内模统一预测控制的进一步分析[J].自动化学报,1999,04:13-20.
[17]付拴俊.下承式刚性吊杆三铰钢拱桥受力性能研究[D].长安大学,建筑与土木工程（专业学位）,2014,硕士.
[18]陈小虎.钢材表面HVOF热喷涂WC-Co涂层的制备及其性能研究[D].南京航空航天大学,材料学,2014,硕士.
[19]宋利梅.Esterel语言在嵌入式系统开发中的研究及应用[D].广东工业大学,软件工程,2004,硕士.
[20]李晓琳.基于SV数学形态学的医学图像处理方法研究[D].广东工业大学,计算机技术（专业学位）,2014,硕士.
[21]凌代红.基于MS Agent和TTS的剧本引擎的设计与应用[D].浙江工业大学,计算机技术,2012,硕士.
[22]徐萍.低温等离子体对聚酯丝网表面改性研究[D].苏州大学,纺织工程,2014,硕士.
[23]王娟.新疆少数民族大学生国家认同状况实证研究[D].新疆师范大学,马克思主义民族理论与政策,2013,硕士.
[24]张心畅.润方地产信贷项目风险评价研究[D].燕山大学,项目管理,2014,硕士.
[25]候慧超.布谷鸟优化算法改进及与粒子群算法融合研究[D].渤海大学,运筹学与控制论,2014,硕士.
[26]武银银.新型钛氧簇合物的合成及性质研究[D].苏州大学,无机化学,2014,硕士.
[27]赵佩.养血清脑颗粒对硝酸甘油致偏头痛大鼠硬脑膜肥大细胞脱颗粒的影响[D].山西医科大学,神经病学（专业学位）,2013,硕士.
[28]何阳.党政干部在线学习平台管理子系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[29]石睿柯.我国货币政策周期与经济周期之间的联动机制研究[D].吉林大学,数量经济学,2014,硕士.
[30]尚磊,孙丹,胡家兵,贺益康,王波.三相电压型并网逆变器滑模变结构直接功率控制[J].电力系统自动化,2010,14:79-83.
[31]赵崇.教学型PACS系统中的医学图像处理的相关技术研究[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[32]冯凯,陈刚,罗敏学.二次定位技术的应用[J].石油地球物理勘探,2006,03:346-349+362+20.
[33]刘晓庆.热处理的转基因和非转基因大豆对不同食性鱼类的影响[D].安徽大学,生态学,2013,硕士.
[34]郑卫东.高容量富锂锂离子电池正极材料的制备、改性及性能研究[D].宁波大学,物理化学,2014,硕士.
[35]缪志高.半监督排序学习算法研究[D].中国科学技术大学,计算机软件与理论,2014,硕士.
[36]许琳,王蓓,张晖.关于农村残疾人的社会保障与社会支持现状研究[J].南京社会科学,2006,05:97-105.
[37]刘岩,张洪波,李辉.1000m~3球型天然气贮罐现场组焊监检方法[J].一重技术.2003(03)
[38]连捷,赵军.不确定切换系统的鲁棒H_∞控制:滑模控制设计(英文)[J].自动化学报,2009,07:965-970.
[39]陈远旭.新疆道路客运企业安全生产管理综合评价研究[D].新疆农业大学,载运工具运用工程,2012,硕士.
[40]乔鹏炜,周小勇,杨军,陈同斌,雷梅.土壤重金属元素迁移模拟方法在矿集区适用性比较[J].地质通报,2014,08:1121-1131.
[41]李正文,李琼.油气储集层地震综合预测及应用研究[J].石油地球物理勘探,2002,S1:93-96+221.
[42]徐建宁.湖北石首麋鹿疫病暴发后的种群动态和发情期群主行为[D].中南林业科技大学,动物学,2013,硕士.
[43]邹旭婷.基于能量的图像碎片拼接研究[D].北京交通大学,2014.
[44]朱瑛.论抗战时期新疆抗战文化[D].华东师范大学,马克思主义理论与思想政治教育,2003,硕士.
[45]刘碧川.模块化自重构机器人能控性及运动规划研究[D].杭州电子科技大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[46]刘永红.现代汉语转折复句的逻辑语义分析[D].广西师范大学,汉语言文字学,2003,硕士.
[47]邓巧凤.采用基因导入法培育3种被毛稀疏小鼠[D].扬州大学,皮肤病与性病学,2012,硕士.
[48]王丽.新型共聚聚乳酸/纳米β/磷酸三钙可吸收双层椎间融合器的研制及其降解性能研究[D].复旦大学,材料物理与化学,2012,硕士.
[49]黄呈江.民族地区义务教育阶段师资建设研究[D].西南大学,教育经济与管理,2014,硕士.
[50]蒋小强.荷斯坦牛Hsp70-1和Hsp32基因SNP位点与生产性能及乳腺炎抗性的相关性研究[D].南京农业大学,动物遗传育种,2012,硕士.